Stiftelsen lantbruksforskning

Lantbruks- och trädgårdsföretagarnas egen forskningsstiftelse finansierar behovsdriven forskning för svenska förhållanden.
Läs mer

MALDI-TOF snabb test av bakterier i let-vätske från hästar med misstänkt let-infektion.

Status: Avslutat
Projektnummer: H1247133
Kategori: Research program | Horse
Ansökningsår: 2012
Datum för slutrapport: 28 februari 2018
Huvudsökande: Pia Haubro Andersen
Organisation: Sveriges lantbruksuniversitet, SLU
E-postadress: pia.haubro.andersen@slu.se
Telefon: ?
Medsökande: John Pringle
Beviljade medel: 288 000 SEK

Many horses with bacterial infection of a synovial structure do not survive or regain their full athletic performance. One essential prognostic factor is time from contamination until correct treatment is initiated. Proper treatment requires a microbiological diagnosis and this process takes 2 -3 days. However, with mass spectrophotometry, MALDI TOF, rapid detection of bacteria, “fingerprinting”, is enabled. This project investigates the performance of MALDI TOF rapid microbiological diagnosis under hospital conditions. Synovia from 125 horses with suspected synovial sepsis is analyzed in parallel by conventional phenotyping and by MALDI-TOF after 2, 4, 8 and 24 hours. This will allow 1) evaluation of the performance of MALDI-TOF in synovial sepsis. Further deliverances will be 2) the first description of occurrence and susceptibility pattern of microbes involved in synovial sepsis in Swedish horses and 3) estimates of Swedish survival rates under state-of-the-art hospital conditions.

Många hästar som drabbas av bakteriella infektioner i synoviala strukturer kommer inte återfå sin fulla prestationsförmåga eller kommer behöva avlivas. En viktig prognostisk faktor är tiden från kontamination till dess att rätt behandling sätts in. Korrekt insatt behandling kräver en mikrobiologisk diagnos och denna process tar normalt 2 -3 dagar. Med hjälp MALDI TOF (masspektrofotometri) är nu en snabb detektion av bakterier möjlig. Detta projekt utvärderar MALDI TOF som metod för diagnostik av synoviala infektioner i en sjukhus miljö. Synovia från 125 hästar med misstänkt synovial infektion kommer analyseras parallellt genom konventionell fenotypning och genom analys med MALDI-TOF. Studiet kommer ge information av hur väl MALDI-TOF fungerar i dissa fall. Studiet kommar vara den första som beskriver ”känslighetmönster” för mikrober som är involverade i synoviala infektioner hos Svenska hästar, och kommer även ge statistik för dessa hästar med avseende överlevnad och prestationsförmåga

Korrekt behandling av infekterade leder kräver en mikrobiell diagnos vilket kan ta upp till en vecka. Med mass-spektrofotometri, MALDI-TOF, kan snabb identifiering av bakteriers "fingeravtryck" göras. Vi undersökte den kliniska användbarheten av MALDI-TOF vid hästsjukhus. Synovia från hästar med misstänkt ledinfektion samlades och analyserades med både traditionell odling och MALDI-TOF. Preliminära resultat visar att MALDI-TOF kan användas för att detektera bakterier i synovia, men först efter odling i passande medium och extraktion. De två metoderna identifierade samma bakterier. Totalt 69% av proverna var negativa med båda metoderna. MALDI-TOF detekterade inte bakterier i prover som var negativa med den traditionella metoden. Till dess logistiken möjliggör utnyttjande av metodens snabbhet bör kliniker fortsatt lita till behandlingar som innefattar ledspolningar, användande av bredspektrumantibiotika och analys av leukocytantal och diffentialräkning i synovia.

Slaget om den infekterade leden!
På insidan av en frisk led eller senskida finns en viskös, smörjande vätska som kallas synovia. Den innesluts av ett membran som både producerar vätskan och skyddar leden. Om leden skadas -via trauma eller infektion, börjar membranet att producera bioaktiva substanser som ska förstöra främmande material och som attraherar vita blodceller till försvar. Processen kallas inflammation och om mikroorganismer finns i leden är diagnosen ledinfektion.Närvaro av bakterier i en led ger särskilt stor fara för ledhälsan. De bioaktiva substanserna från inflammationen skiljer inte mellan "dåliga" celler, så som bakterier, och "goda" celler, så som ledbrosk. Nedbrytning av ledbrosket kan därför ske snabbt, inom ett dygn. Eftersom förstört ledbrosk inte kan repareras uppstår en permanent ledskada. För att vinna slaget om den infekterade leden måste behandling mot inkräktande bakterier därför sättas in så snabbt och effektivt som möjligt. Det görs tillexempel genom ledspolning och genom deponering av effektivt antibiotikum i leden. Den slutgiltiga diagnosen ledinfektion ställs via synoviaprov som sänds till laboratorium, där odling av vätskan påvisar eventuella bakteriers typ och om de är känsliga mot antibiotika. Processen tar många dagar, upp till en vecka. Den akut insatta behandlingen måste därför baseras på erfarenhet och kliniska tecken. Först när odlingsresultaten inkommer kan behandlingen förändras eller avbrytas. Den nya metoden mass-spektrofotometri baserade metod MALDI TOF avläser bakteriers "fingeravtryck" väldigt snabbt Kanske kan den ge möjlighet till omedelbar bakterieidentifiering och riktad behandling? Metoden är snabb för vanliga bakterier som kan odlas i en Petriskål, men ledbakterier måste förodlas i en flaska med näringsmedium. Därför behövs en utvärdering av om metoden faktiskt ger en korrekt och snabb mikrobielldiagnos vid ledinfektion hos hästar. Också generell kunskap om vilka bakterier som är involverade vid ledinfektion hos svenska hästar och vilka antibiotikatyper bakterierna är känsliga för saknas.

Vårt projekt har därför undersökt synovia från hästar med misstänkt ledinfektion både genom traditionella metoder och MALDI TOF. Genomgång av odlingsresultat från djursjukhusjournaler från 2010-2016 har också gjorts. Studien är utförd på två stora hästsjukhus: Universitetsdjursjukhuset vid Sveriges Lantbruksuniversitet och Evidensia Specialistdjursjukhuset i Helsingborg. Våra preliminära resultat visar att MALDI TOF kan användas för att påvisa bakterier efter odling av synovian i 24 timmar och extraktion med en manuell metod. Eftersom odling och extraktion är tidskrävande kan snabbheten i MALDI TOF-metoden inte fullt utnyttjas. MALDI TOF och traditionell bakterieodling påvisade samma bakterier i proverna: Actinobacillus ssp, Aerococcus viridians, Arthrobacter spp, Bacillus cereus, Dichelobacter nodosus, Escherichia coli, Staphylococcus spp. och Streptococcus spp. I det preliminära materialet var 69% av proverna utan fynd av bakterier med båda metoderna. Det betyder att MALDI TOF-metoden inte hittade bakterier i prover där den traditionella odlingen var negativ. Det är en besvikelse eftersom vi hade hoppats att MALDI TOF skulle vara känsligare än den traditionella metoden. De preliminära resultaten visar också att varken hästens hälta eller grumlighet och färg på synovian kunde kopplas till diagnosen ledinfektion eller till den angripande bakteriesorten. I studien var de mest pålitliga tecknet på ledinfektion påvisande av höga nivåer av de försvarande vita blodcellerna neutrofiler i synovian.

Sammanfattningsvis är MALDI TOF-metoden pålitlig för att analysera bakterier i synovia från hästar. Den ger samma känslighet som den traditionella odlingsmetoden men kan potentiellt ge en stor tidsvinst. Men till dess logistiken möjliggör utnyttjande av metodens snabbhet bör kliniker fortsatt lita till akuta behandlingar som innefattar ledspolningar, användande av bredspektrumantibiotika och uppföljning av synovia baserad på analys av vita
blodceller.

 

Antal träffar i projektbanken: 1676

Hållbarhet & strukturomvandling i svensk mjölkproduktion
Ruben Hoffmann

Projektnummer: O-20-20-475 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020

Milk

This interdisciplinary project examines how Swedish dairy farmers, given different types of policy instruments, are affected by the ongoing structural transformation in the primary production. The study will improve our understanding about how the ongoing structural change affects profitability in …

Läs mer

Lönsam vinbärsodling genom feromonbaserad kontroll av skadeinsekter
Olle Anderbrant

Projektnummer: O-20-20-452 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020

Horticulture

The project will develop sustainable pheromone-based methods to reduce the damage from three moth species on currants, thereby enabling profitable cultivation irrespective of management practice. During several years, the currant cultivation has decreased in Sweden and also the yield per ha has …

Läs mer

Hur bekämpa hönshirs samt förebygga herbicidresistensutveckling
Anneli Lundkvist

Projektnummer: O-20-20-456 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020

Crop production

Spread of barnyard grass, growing in southern Sweden has accelerated during the last decade and is rapidly moving northwards. No herbicide-resistant populations have been reported from Sweden thus far, but it is only a matter of time before barnyard grass will develop herbicide resistance in …

Läs mer

Nya rotsjukdomar i korn och vete- okända hot mot svensk spannmålsodling
Lars Persson

Projektnummer: O-20-20-472 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020

Crop production

Cereal production is limited by many different factors. Leaf diseases are often well known, while diseases on roots are more difficult to identify. Root diseases are often caused by oomycetes, fungus-like microorganisms that live for years in soil and on old root debris, parasitizing the roots of …

Läs mer

Fosfor i matjord och alv i långliggande försök - ett underlag för uppdaterad rådgivning
Gunnar Börjesson

Projektnummer: O-20-20-453 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020

Crop production

A sustainable use of phosphorus fertilizers has engaged a large number of researchers, especially how to measure
the soil content of available phosphorus. However, the development of results to useful methods for agriculture has
not been a priority. The recommendations are based on extraction with …

Läs mer

Förbättrad ekonomi på biogasanläggningar och i gödselhantering genom fler nationella standardmetoder för hygienisering
Petter Melin, RISE Research Institutes of Sweden AB

Projektnummer: JTI-20-83-495 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020

According to applicable legislation, manure and digestate must be sanitized in order to prevent disease transmission before they may be merchandised on the open market. Swedish plants currently have the choice between using one of two standard methods (70 °C for 1 h, or 52 °C for 10 h), or carry …

Läs mer
Prenumerera på vårt nyhetsbrev