Lantbruks- och trädgårdsföretagarnas egen forskningsstiftelse finansierar behovsdriven forskning för svenska förhållanden.
Läs mer
Lantbruks- och trädgårdsföretagarnas egen forskningsstiftelse finansierar behovsdriven forskning för svenska förhållanden.
Läs mer
Status: | Avslutat |
Projektnummer: | H0947014 |
Kategori: | Research program | Horse |
Ansökningsår: | 2009 |
Datum för slutrapport: | 13 september 2013 |
Huvudsökande: | Eva Skiöldebrand |
Organisation: | Sveriges lantbruksuniversitet, SLU |
E-postadress: | eva.skioldebrand@clinchem.gu.se |
Telefon: | 031-407978 |
Sammanfattning av slutrapport
Inflammation i leder är den vanligaste anledningen till att tävlingshästar blir halta. Orsaken är oftast att en led överbelastas när hästen springer och en inflammation uppstår. Inflammationen innebär en gradvis nedbrytning av lederna och resulterar slutligen i kronisk hälta och ledbroskskada. När inflammationen startar läcker vävnadsproteiner eller delar av dem (fragment) ut i ledvätskan och i blodet. Syftet med forskningsprojektet är att identifiera dessa fragment genom och på så sätt skulle man kunna diagnostisera sjukdomen mycket tidigt. I projektet har vi identifierat ett fragment från brosket som är specifik för inflammationen. Med antikroppar kan vi fiska ut fragmentet i ledvätska och serum på hästar med ledinflammation. Identifieringen av fragmentet genererat i inflammationsmodellen ger oss enorma möjligheter att utreda dess betydelse för identifiering av tidig skada i brosk och hur väl detta avspeglar sig i vävnadsprov hos häst med ledinflammation.
Populärvetenskaplig sammanfattning
Syfte med studien
Våra kliniskt övergripande frågeställningar har varit:
Är det möjligt att tidigt, långt före hästen visar kliniska symtom, påvisa en nedbrytande processer i leden och därmed kunna prognostisera sjukdomsförloppet vid ledinflammation.
Inflammation i leder är den vanligaste anledningen till att tävlingshästar blir halta. Orsaken är oftast att en led överbelastas när hästen springer och en inflammation uppstår. Inflammationen innebär en gradvis nedbrytning av lederna och resulterar slutligen i kronisk hälta och ledbroskskada. I framtiden hoppas man kunna upptäcka skadan tidigt med hjälp av s k biomarkörer och därmed förhindra nedbrytningen av vävnaden i leden. När inflammationen startar läcker vävnadsproteiner eller delar av dem (fragment) ut i ledvätskan och i blodet. Syftet med forskningsprojektet är att identifiera dessa fragment genom och på så sätt skulle man kunna diagnostisera sjukdomen mycket tidigare än vad det är möjligt idag.
Resultat
Identifiering av COMP fragment och klyvningställe med avseende på sin aminosyra sammansättning och storlek.
Ett flertal unika nedbrytningsprodukter från COMP proteinet identifierades i odlingsmediet från broskpluggar som behandlats med inflammations enzym. Dessa fragment fanns endast i låg förekomst i kontroll mediet.
Antikroppsframställning av polyklonala antikroppar riktade mot de specifika fragmentet.
Från företaget GenScript USA Inc beställdes en polyklonal antikropp mot ett utvalt COMP fragment. Antisera från kaninen testades därefter i en direkt ELISA med serum- och ledvätskeprov från häst. Resultatet visade en låg förekomst hos friska hästar och en hög förekomst hos hästar med OA.
FramställningELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) och validering av metoden.
Nu sker en fortsatt klinisk validering av fragmentets betydelse i ledvätska och serum hos häst med olika stadier av OA samt om den kan indikera en ökad brosknedbrytning hos travare i träning.
Metod
Broskpluggar togs ut ur kotleden från friska hästar efter slakt. Pluggarna odlades i fuktkammare och i näringslösning under 24 dagar. Till hälften av pluggarna tillsattes ett enzym som startar en specifik inflammation i brosket, de andra pluggarna användes som kontroll. De i brosket ingående proteinerna bryts ned av inflammationsprocessen och nedbrytningsprodukterna läcker ut från broskpluggen ut i näringslösningen. En mycket avanserad metod för att identifiera och kvantifiera de nya nedbrytningsprodukterna användes och proteinets aminosyra sammansättning kunde klarläggas. Därefter framställde en antikropp som riktade sig specifikt mot nedbrytningsprodukten och som sedan användes för upptäcka nedbrytningsprodukten i blod och ledvätska från sjuka hästar.
Slutsats och behov av vidare studier
Identifieringen av COMP fragmentet genererat i inflammationsmodellen ger oss enorma möjligheter att utreda COMP fragmentets betydelse för identifiering av tidig skada i brosk och hur väl detta avspeglar sig i vävnadsprov hos häst med ledinflammation. Nu vill vi gå vidare med framställandet av fler antikroppar mot andra broskmolekylers fragment så att vi på så sätt får fram ett batteri av antikroppar. Resultatet från ett större antal molekylers nedbrytningsstatus skulle ge oss stora möjligheter att mäta effekten av läkemedel som injiceras i leden.
Projektnummer: JTI-21-83-606 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2021
The overall purpose of the project is to generate a base for recommendations for construction of new subsurface drainage and re-drainage of clay soils in the area Water - resource efficient management. Efficient drainage of arable land is important to increase crop production, to achieve …
Läs merProjektnummer: JTI-20-83-494 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020
For sustainable future development, it is essential to recirculate plant nutrients from different parts of society,
especially sewage plants, back to arable land. The aim of the proposed project is to ensure that high-quality fertiliser
products attractive for agricultural use are produced from …
Projektnummer: O-20-23-462 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020
The goal of the project is to digitize the data from the Swedish official field trials through automated estimates of important traits such as germination, growth, resistance, maturity and the effect of plant protection products. The purpose is to streamline and improve scoring of both diseases but …
Läs merProjektnummer: R-18-26-131 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2018
In the proposed project, we will explore the benefits of increasing the longevity of dairy cows under Swedish conditions by changes in herd management. We will focus on effects on methane emissions by modelling, using existing data from the Swedish Official Milk Recording Scheme and results from an …
Läs merProjektnummer: R-19-25-287 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2019
The purpose of this project is to develop new non-chemical methods for control of different seedborne-and soilborne pathogens. Aerated steam treatment (ThermoSeed) is a modern and environmentally friendly method for seedborne pathogen sanitation, mainly used on cereals. We intend to develop the …
Läs merProjektnummer: O-20-23-461 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020
The purpose of this project is to investigate to what extent substances in algae inhibit microbial methane formation in cows. Several substances, so-called bioactive substances, in red, green and brown algae, have a significant methane reducing effect. These are promising results but in order to …
Läs merProjektnummer: R-18-26-134 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2018
Food production needs to increase in a sustainable way. This great challenge requires evaluation methods that gives information for better understanding of the impacts from agriculture and food and how to manage those impacts. The project addresses methodologies that include a broad range of …
Läs merProjektnummer: H-19-47-486 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2019
Cannabinoids have potential to induce analgesia and muscle relaxation which would be beneficial for equine practice. Today there is no drug labelled for veterinary use containing these cannabinoids, but there are some herbal oil products which unofficially have been reported to be used in horses, …
Läs merProjektnummer: O-19-20-319 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2019
This project aims to modify existing sensor systems for adapted nitrogen fertilization to consider water stress at
supplementary fertilization in cereals. Different approaches to consider sensor data and soil information will be tested
in field trials. Current commercial systems interpret water …
Projektnummer: R-18-26-005 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2018
The sensory attributes of the raw milk are of major importance for the quality of the resulting dairy products. Since the early 90’ies, the so-called “blueberry off-flavour” has caused severe economic consequences for affected dairy farmers. The mechanism behind is still unclear, although forages …
Läs mer