Lantbruks- och trädgårdsföretagarnas egen forskningsstiftelse finansierar behovsdriven forskning för svenska förhållanden.
Läs mer
Lantbruks- och trädgårdsföretagarnas egen forskningsstiftelse finansierar behovsdriven forskning för svenska förhållanden.
Läs mer
Status: | Avslutat |
Projektnummer: | H0947014 |
Kategori: | Research program | Horse |
Ansökningsår: | 2009 |
Datum för slutrapport: | 13 september 2013 |
Huvudsökande: | Eva Skiöldebrand |
Organisation: | Sveriges lantbruksuniversitet, SLU |
E-postadress: | eva.skioldebrand@clinchem.gu.se |
Telefon: | 031-407978 |
Sammanfattning av slutrapport
Inflammation i leder är den vanligaste anledningen till att tävlingshästar blir halta. Orsaken är oftast att en led överbelastas när hästen springer och en inflammation uppstår. Inflammationen innebär en gradvis nedbrytning av lederna och resulterar slutligen i kronisk hälta och ledbroskskada. När inflammationen startar läcker vävnadsproteiner eller delar av dem (fragment) ut i ledvätskan och i blodet. Syftet med forskningsprojektet är att identifiera dessa fragment genom och på så sätt skulle man kunna diagnostisera sjukdomen mycket tidigt. I projektet har vi identifierat ett fragment från brosket som är specifik för inflammationen. Med antikroppar kan vi fiska ut fragmentet i ledvätska och serum på hästar med ledinflammation. Identifieringen av fragmentet genererat i inflammationsmodellen ger oss enorma möjligheter att utreda dess betydelse för identifiering av tidig skada i brosk och hur väl detta avspeglar sig i vävnadsprov hos häst med ledinflammation.
Populärvetenskaplig sammanfattning
Syfte med studien
Våra kliniskt övergripande frågeställningar har varit:
Är det möjligt att tidigt, långt före hästen visar kliniska symtom, påvisa en nedbrytande processer i leden och därmed kunna prognostisera sjukdomsförloppet vid ledinflammation.
Inflammation i leder är den vanligaste anledningen till att tävlingshästar blir halta. Orsaken är oftast att en led överbelastas när hästen springer och en inflammation uppstår. Inflammationen innebär en gradvis nedbrytning av lederna och resulterar slutligen i kronisk hälta och ledbroskskada. I framtiden hoppas man kunna upptäcka skadan tidigt med hjälp av s k biomarkörer och därmed förhindra nedbrytningen av vävnaden i leden. När inflammationen startar läcker vävnadsproteiner eller delar av dem (fragment) ut i ledvätskan och i blodet. Syftet med forskningsprojektet är att identifiera dessa fragment genom och på så sätt skulle man kunna diagnostisera sjukdomen mycket tidigare än vad det är möjligt idag.
Resultat
Identifiering av COMP fragment och klyvningställe med avseende på sin aminosyra sammansättning och storlek.
Ett flertal unika nedbrytningsprodukter från COMP proteinet identifierades i odlingsmediet från broskpluggar som behandlats med inflammations enzym. Dessa fragment fanns endast i låg förekomst i kontroll mediet.
Antikroppsframställning av polyklonala antikroppar riktade mot de specifika fragmentet.
Från företaget GenScript USA Inc beställdes en polyklonal antikropp mot ett utvalt COMP fragment. Antisera från kaninen testades därefter i en direkt ELISA med serum- och ledvätskeprov från häst. Resultatet visade en låg förekomst hos friska hästar och en hög förekomst hos hästar med OA.
FramställningELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay) och validering av metoden.
Nu sker en fortsatt klinisk validering av fragmentets betydelse i ledvätska och serum hos häst med olika stadier av OA samt om den kan indikera en ökad brosknedbrytning hos travare i träning.
Metod
Broskpluggar togs ut ur kotleden från friska hästar efter slakt. Pluggarna odlades i fuktkammare och i näringslösning under 24 dagar. Till hälften av pluggarna tillsattes ett enzym som startar en specifik inflammation i brosket, de andra pluggarna användes som kontroll. De i brosket ingående proteinerna bryts ned av inflammationsprocessen och nedbrytningsprodukterna läcker ut från broskpluggen ut i näringslösningen. En mycket avanserad metod för att identifiera och kvantifiera de nya nedbrytningsprodukterna användes och proteinets aminosyra sammansättning kunde klarläggas. Därefter framställde en antikropp som riktade sig specifikt mot nedbrytningsprodukten och som sedan användes för upptäcka nedbrytningsprodukten i blod och ledvätska från sjuka hästar.
Slutsats och behov av vidare studier
Identifieringen av COMP fragmentet genererat i inflammationsmodellen ger oss enorma möjligheter att utreda COMP fragmentets betydelse för identifiering av tidig skada i brosk och hur väl detta avspeglar sig i vävnadsprov hos häst med ledinflammation. Nu vill vi gå vidare med framställandet av fler antikroppar mot andra broskmolekylers fragment så att vi på så sätt får fram ett batteri av antikroppar. Resultatet från ett större antal molekylers nedbrytningsstatus skulle ge oss stora möjligheter att mäta effekten av läkemedel som injiceras i leden.
Projektnummer: O-20-20-475 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020
This interdisciplinary project examines how Swedish dairy farmers, given different types of policy instruments, are affected by the ongoing structural transformation in the primary production. The study will improve our understanding about how the ongoing structural change affects profitability in …
Läs merProjektnummer: O-20-23-461 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020
The purpose of this project is to investigate to what extent substances in algae inhibit microbial methane formation in cows. Several substances, so-called bioactive substances, in red, green and brown algae, have a significant methane reducing effect. These are promising results but in order to …
Läs merProjektnummer: O-21-20-626 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2021
In modern large-scale pig production, first-rate hygienic conditions are necessary to avoid outbreaks of diseases and promote and maintain a good biosecurity, However, evaluation of pen hygiene is highly subjective. The project aims to adapt and evaluate a new method for the standardised measure of …
Läs merProjektnummer: H-21-47-631 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2021
While the equine sector in Sweden and Norway provides leisure activities, entertainment and employment for many people of all ages, these come with associated negative effects. Studies of the environmental impacts caused by the sector show that nutrient leakage from manure piles, paddocks and …
Läs merProjektnummer: H-21-47-653 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2021
The aim of the project is to characterize genomic diversity and inbreeding, within and between Nordic native horse breeds, with special focus on the Norwegian and Swedish breeds. For this we will use whole genome sequencing of individual and pooled DNA samples. Genomic characterization is an …
Läs merProjektnummer: JTI-21-83-606 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2021
The overall purpose of the project is to generate a base for recommendations for construction of new subsurface drainage and re-drainage of clay soils in the area Water - resource efficient management. Efficient drainage of arable land is important to increase crop production, to achieve …
Läs merProjektnummer: JTI-21-83-613 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2021
For a sustainable food production, the plant nutrients in the food we consume need to be redirected back to agricultural land. Ammonia sanitization is rather new but simple and scalable technology to sanitize waste fractions and have been implemented for decentralized reuse of source separated …
Läs merProjektnummer: R-21-47-575 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2021
Decreasing population sizes and risk of accumulation of inbreeding is a challenge for the national Norwegian horse breeds; the Dole, the Fjord and the Nordland/Lyngen. The average breed-specific reduction in covered mares is between 37% and 45%, when comparing the years 2000 to 2009 to the years …
Läs merProjektnummer: JTI-20-83-494 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020
For sustainable future development, it is essential to recirculate plant nutrients from different parts of society,
especially sewage plants, back to arable land. The aim of the proposed project is to ensure that high-quality fertiliser
products attractive for agricultural use are produced from …
Projektnummer: O-20-20-472 • Status: Pågående • Ansökningsår: 2020
Cereal production is limited by many different factors. Leaf diseases are often well known, while diseases on roots are more difficult to identify. Root diseases are often caused by oomycetes, fungus-like microorganisms that live for years in soil and on old root debris, parasitizing the roots of …
Läs mer